معرفی چند آنزیم

    آنزیم T4 لیگاز

آنزیم T4 DNA ligase مهم‌ترین آنزیم کد شده توسط ژنوم باکتریوفاژ می‌باشد و برای متابولیسم ویروس، همانند‌سازی ژنوم، نوترکیبی و ترمیم استفاده می‌شود. این آنزیم ناپیوستگی‌های موجود در اسکلت DNA را با ایجاد پیوند فسفو‌دی‌استر بین انتهای´ ۵ فسفات و ´ ۳ هیدروکسی در یک واکنش چند مرحله‌ای وابسته به آدنوزین‌تری‌فسفات به هم متصل می‌کند.

آنزیم Taq DNA Polymerase

یکی از مهمترین آنزیم‌ها در واکنش‌های زنجیره‌ای پلیمراز، آنزیم Taq DNA Polymerase می‌باشد. این آنزیم برای تعیین توالیDNA، نشانه‌دار کردن DNA و تکنیک‌های متعدد در بیولوژی مولکولی کاربرد دارد.

 Taq DNA Polymerase از باکتری Thermus aquaticus بدست می‌آید و دارای فعالیت اگزونوکلئازی در جهت ‘۵ ‘۳ است ولی فاقد فعالیت ویرایشی می‌باشد. درجه حرارت مطلوب برای فعالیت آنزیم ۷۵-۸۰ درجه سانتیگراد می باشد. این آنزیم دارای نیمه عمر بیشتر از ۲ ساعت در ، ۴۰ دقیقه در ۹۵ درجه سانتیگراد و ۹ دقیقه در ۹۷/۵ درجه سانتیگراد می باشد. آنزیم GABIT Taq DNA Polymerase دارای فعالیت سنتز رشته DNA به طول ۵ کیلو باز در کمتر از ۱۰ ثانیه در ۷۲ درجه سانتیگراد است.

آنزیم Tth p DNA polymerase

Tthp DNA polymerase نوعی آنزیم مقاوم در برابر حرارت، با وزن مولکولی ۹۴ کیلودالتون از باکتری گرمادوست Thermus thermophilus می‌باشد. این آنزیم در دمای۷۴ درجه سانتیگراد و در حضور یون منیزیم فعالیت پلیمریزاسیون را به صورت رونویسی از رشته مولکول DNA و در جهت ´۳ ´۵ انجام می‌دهد. همچنین آنزیم Tth DNA polymerase دارای فعالیت اگزونوکلئازی در جهت ´۵ ´۳ می‌باشد

کارکرد : سنتز DNA در جهت ´۳ ´ ۵ با حضور کوفاکتور منیزیم

آنزیم Tth r DNA polymerase

Tthr DNA polymerase نوعی آنزیم مقاوم در برابر حرارت، با وزن مولکولی ۹۴ کیلودالتون از باکتری گرمادوست Thermus thermophilus می باشد. این آنزیم در دمای ۷۴ درجه سانتیگراد و در حضور یون منگنز فعالیت پلیمریزاسیون را به صورت رونویسی رشته DNA از روی RNA و در جهت ´۳ ´۵ انجام می‌دهد. همچنین آنزیم Tthr DNA polymerase دارای فعالیت اگزونوکلئازی در جهت ´۵ ´۳ می باشد.

آنزیم Tth p DNA polymerase

Tthp DNA polymerase نوعی آنزیم مقاوم در برابر حرارت، با وزن مولکولی ۹۴ کیلودالتون از باکتری گرمادوست Thermus thermophilus می‌باشد. این آنزیم در دمای۷۴ درجه سانتیگراد و در حضور یون منیزیم فعالیت پلیمریزاسیون را به صورت رونویسی از رشته مولکول DNA و در جهت ´۳ ´۵ انجام می‌دهد. همچنین آنزیم Tth DNA polymerase دارای فعالیت اگزونوکلئازی در جهت ´۵ ´۳ می‌باشد.